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Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine, PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。 Annexin Ⅴ（膜联蛋白 V） 是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合，将Annexin V 进行荧光素FITC标记，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
具体表现为： 细胞胀大，胞膜破裂，细胞内容物外溢，核变化较慢，DNA降解不充分，会引起局部严重的炎症反应（如下图所示）。 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine, PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。
凋亡细胞 DNA 含量的流式细胞计分析 方法 收集细胞→70% 冷乙醇（PBS 稀释）4 °C 固定过夜→PBS 洗涤，1 000 rpm × 10 min→RNase A（0.5 mg/ml）37 °C 消化 30 min→PI（50 mg/ml）染色，室温避光 15 min→FACScan 分析 DNA 亚二倍体的形成及细胞 ...
然而，凋亡细胞调节上述过程的机制目前仍不清楚。 作者的研究结果发现，凋亡代谢物分泌组（secretome）不是简单的被动排空细胞内容物，而是一个调控过程。 caspase介导的质膜PANX1通道开放，促进了细胞凋亡过程中持续释放有活力的代谢物。